二手高效液相色譜儀是通過將混合物的組分溶解、分配或吸附在固定相和流動(dòng)相中的不同而使組分在相對(duì)運(yùn)動(dòng)過程中多次受到上述各力的作用，從而達(dá)到相互分離的目的。HPLC廣泛應(yīng)用于食品分析，環(huán)境分析，生命科學(xué)，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，無機(jī)分析。一般情況下，80%-85%的有機(jī)物可以采用二手HPLC。
1、輸液系統(tǒng)
包括溶劑柜、真空脫氣機(jī)、溶劑混合器、高壓泵等，其中核心部分是泵；泵的作用提供足夠的驅(qū)動(dòng)力使流動(dòng)相通過填充緊密的色譜柱。
洗脫方式也分為兩種：
（1）等度洗脫：在同一分析周期內(nèi)流動(dòng)相組成保持恒定，適合于組分?jǐn)?shù)目較少，性質(zhì)差別不大的樣品。
（2）梯度洗脫：采用兩種（或多種）不同極性的溶劑，在分離過程中按一定程序連續(xù)改變流動(dòng)相的濃度配比和極性的一種洗脫模式。用于分析組分?jǐn)?shù)目多、性質(zhì)差異較大的復(fù)雜樣品。
2、進(jìn)樣系統(tǒng)
把分析試樣有效地送入色譜柱進(jìn)行分離。一般有自動(dòng)進(jìn)樣器和手動(dòng)進(jìn)樣器，進(jìn)樣量應(yīng)不小于定量環(huán)體積的5-10倍（最少3倍）。
3、分離系統(tǒng)
主要是色譜柱，色譜柱是一根裝滿填料的管子。色譜柱的材料有不銹鋼、塑料、玻璃等，其尺寸（內(nèi)徑、長(zhǎng)短）不盡相同；色譜柱填料主要有硅膠基質(zhì)和聚合物基質(zhì)，填料的粒徑不盡相同。
4、檢測(cè)器
對(duì)檢測(cè)器的要求：靈敏度高、重現(xiàn)性好、線性范圍寬、死體積小、對(duì)溫度及流量的變化不敏感等。主要有紫外檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、示差檢測(cè)器等。
